SLC6A15 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-410592

Descripción general

SLC6A15 codifica un transportador de aminoácidos neutros dependiente de sodio de la familia SLC6 que media la captación celular de aminoácidos de cadena ramificada y otros aminoácidos neutros, contribuyendo a la homeostasis de aminoácidos y al metabolismo relacionado con neurotransmisores. Se encuentra enriquecido en tejidos neuronales y sustenta procesos como la detección de nutrientes, la función sináptica y el acoplamiento metabólico a través de vías vinculadas a la disponibilidad de aminoácidos y a las respuestas celulares al estrés. La variación o la expresión alterada de SLC6A15 se ha asociado en estudios de investigación con fenotipos neuropsiquiátricos y con la biología relacionada con el estrés, lo que refleja su papel en la resiliencia metabólica neuronal. Como transportador de membrana, SLC6A15 también ofrece un punto de entrada práctico para estudiar la regulación de transportadores, su tráfico intracelular y la señalización dependiente del sustrato en modelos celulares humanos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SLC6A15 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SLC6A15 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SLC6A15 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SLC6A15 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SLC6A15.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SLC6A15 para la investigación de la señalización de SLC6A15, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SLC6A15 críticos para la función de SLC6A15
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SLC6A15 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SLC6A15 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SLC6A15 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SLC6A15. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SLC6A15 (h) y el plásmido HDR SLC6A15 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SLC6A15 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SLC6A15 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.