Plásmido Doble Nickase (h) SLC6A14: sc-408198-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)SLC6A14 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SLC6A14 (h) y el plásmido de doble nickasa SLC6A14 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SLC6A14. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) SLC6A14 | sc-408198-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) SLC6A14 | sc-408198-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC6A14 (ATB0,+) codifica un transportador de membrana plasmática dependiente de Na+/Cl− que media la captación de amplio espectro de aminoácidos neutros y catiónicos, incluidos los de cadena ramificada y los esenciales. Al regular la disponibilidad intracelular de aminoácidos, SLC6A14 influye en vías de señalización de detección de nutrientes y metabolismo, como mTORC1, favorece la síntesis proteica y modula el equilibrio redox mediante el flujo de aminoácidos. La expresión y actividad de SLC6A14 se han vinculado a programas de transporte epitelial y a una adquisición de nutrientes alterada en varios contextos patológicos, lo que lo convierte en un objetivo útil para estudiar la reprogramación metabólica y la biología de transportadores. El análisis funcional de SLC6A14 también aporta información sobre los mecanismos de control del crecimiento dependiente de aminoácidos, la adaptación al estrés y la regulación del transporte de membrana en células humanas.
SLC6A14 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SLC6A14 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SLC6A14. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SLC6A14. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SLC6A14 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.