Plásmido Doble Nickase (m) SLC43A2: sc-431993-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)SLC43A2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SLC43A2 (m) y el plásmido de doble nickasa SLC43A2 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Slc43a2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) SLC43A2 | sc-431993-NIC | 20 µg | $410.00 |
Slc43a2 codifica el transportador murino de aminoácidos neutros de gran tamaño SLC43A2 (LAT4), una proteína de membrana que facilita la captación y el eflujo independientes de sodio de aminoácidos esenciales y de cadena ramificada como la leucina, la isoleucina y la valina. Al regular la disponibilidad intracelular de aminoácidos, SLC43A2 influye en programas de detección de nutrientes, incluida la señalización de mTORC1, el control de la traducción y una homeostasis metabólica más amplia. La alteración del transporte de aminoácidos se vincula con frecuencia a cambios en el crecimiento celular, la adaptación al estrés y la función de las células inmunitarias, lo que hace que Slc43a2 sea relevante para estudios de reprogramación metabólica y competencia por nutrientes en el microambiente. La actividad desregulada del transportador se ha asociado con fenotipos proliferativos en modelos experimentales de cáncer e inmunometabolismo, lo que respalda su uso como un nodo mecanístico que conecta el transporte con la señalización.
SLC43A2 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Slc43a2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Slc43a2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Slc43a2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Slc43a2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.