SLC39A13 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406673

Descripción general

SLC39A13 (ZIP13) es un miembro de la familia SLC39 de importadores de zinc que regula la distribución intracelular de Zn2+ al transportar zinc desde compartimentos intracelulares hacia el citosol. Al modular la disponibilidad de zinc, SLC39A13 influye en la actividad de metaloproteínas, la homeostasis redox y las vías de señalización que dependen del zinc como cofactor estructural o catalítico, incluidos procesos vinculados a la organización de la matriz extracelular y al desarrollo del tejido conectivo. La alteración genética de SLC39A13 se ha asociado con una forma espondilóqueirodisplásica del síndrome de Ehlers–Danlos, lo que pone de relieve su relevancia para la maduración del colágeno, la integridad tisular y la mecanobiología. El transporte de zinc alterado mediado por ZIP13 también se ha relacionado con una función fibroblástica desregulada y con amplias respuestas transcripcionales al estrés por metales.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SLC39A13 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SLC39A13 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SLC39A13 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SLC39A13 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SLC39A13.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SLC39A13 para la investigación de la señalización de SLC39A13, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SLC39A13 críticos para la función de SLC39A13
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SLC39A13 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SLC39A13 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SLC39A13 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SLC39A13. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SLC39A13 (h) y el plásmido HDR SLC39A13 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SLC39A13 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SLC39A13 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.