Plásmido Doble Nickase (h) SLC35A5: sc-409546-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)SLC35A5 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SLC35A5 (h) y el plásmido de doble nickasa SLC35A5 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SLC35A5. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) SLC35A5 | sc-409546-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) SLC35A5 | sc-409546-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC35A5 codifica un transportador de azúcares de nucleótido previsto de la familia de transportadores de solutos, que se localiza en la vía secretora y favorece la glicosilación al suministrar donantes de azúcares activados a las glicosiltransferasas luminales. Al influir en la disponibilidad de azúcares de nucleótido en el retículo endoplásmico y el Golgi, SLC35A5 puede modular el ensamblaje de glicanos en proteínas de membrana y secretadas, con efectos posteriores sobre el plegamiento proteico, el tráfico intracelular y las interacciones célula–célula. La glicosilación alterada es una característica común de trastornos del desarrollo y neurológicos, así como de fenotipos asociados al cáncer, lo que hace que SLC35A5 sea relevante para estudiar cómo el transporte de azúcares de nucleótido determina la homeostasis celular. Entre las aplicaciones de investigación se incluyen el análisis de vías de glicosilación específicas de orgánulo, el mapeo de cambios glicoproteómicos y la evaluación de impactos en la secreción y la maduración de receptores en modelos celulares humanos.
SLC35A5 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SLC35A5 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SLC35A5. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SLC35A5. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SLC35A5 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.