SLC35A3 Double Nickase Plasmid (hamster): sc-437326-NIC
- Zielspezies:
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das SLC35A3 Double Nickase Plasmid (hamster) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- SLC35A3 Double-Nickase-Plasmid (hamster) und SLC35A3 Double-Nickase-Plasmid (hamster2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
SLC35A3 Double Nickase Plasmid (hamster) | sc-437326-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SLC35A3 Double Nickase Plasmid (hamster2) | sc-437326-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC35A3 kodiert einen mit Golgi-Apparat und ER assoziierten Nukleotidzucker-Transporter, der den Import von UDP‑N‑Acetylglucosamin in den sekretorischen Weg vermittelt und damit die Glykosylierung von Proteinen und Lipiden unterstützt. Durch die Regulation der Substratverfügbarkeit für Glykosyltransferasen beeinflusst SLC35A3 die N‑Glykosylierung, O‑Glykosylierung und die Proteoglykansynthese und prägt dadurch Transport, Stabilität und Signalübertragung membranständiger und sekretierter Proteine. Störungen dieses Transporters können glykanabhängige Prozesse wie Zelladhäsion, Rezeptorreifung und Immunerkennung verändern und sind daher relevant für Studien zu angeborenen Glykosylierungsstörungen (CDG) sowie zu glykosylierungsassoziierten metabolischen oder neuroentwicklungsbezogenen Phänotypen.
SLC35A3 Das Double-Nickase-Plasmid (hamster) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des -Lokus in -Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die -Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit -Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.