Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
SLC26A3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403891
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- SLC26A3 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico SLC26A3, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SLC26A3 Anticuerpo (H-8): sc-376187
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
SLC26A3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403891 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
SLC26A3 codifica un intercambiador de aniones de membrana (también conocido como DRA) que media el intercambio electroneutro de Cl⁻/HCO₃⁻ en la superficie apical de las células epiteliales, con funciones destacadas en la absorción intestinal de líquidos y electrolitos. Al regular la secreción de bicarbonato y la captación de cloruro, SLC26A3 contribuye al control del pH luminal y a procesos de transporte epitelial que se interconectan con el manejo iónico dependiente de CFTR y la homeostasis de la mucosa. La alteración o desregulación de SLC26A3 se ha relacionado con la diarrea congénita por cloruro y con fenotipos más amplios que involucran la función de la barrera epitelial y la señalización inflamatoria en el tracto gastrointestinal. Por ello, su expresión y actividad son relevantes para estudios sobre diferenciación epitelial, fisiología del transporte y remodelado del microambiente intestinal asociado a la inflamación.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO SLC26A3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SLC26A3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SLC26A3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SLC26A3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SLC26A3.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SLC26A3 para la investigación de la señalización de SLC26A3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de SLC26A3 críticos para la función de SLC26A3
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SLC26A3 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido SLC26A3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SLC26A3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SLC26A3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SLC26A3 (h) y el plásmido HDR SLC26A3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SLC26A3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SLC26A3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.