Plásmido Doble Nickase (h) SLC25A20: sc-407585-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)SLC25A20 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SLC25A20 (h) y el plásmido de doble nickasa SLC25A20 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SLC25A20. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) SLC25A20 | sc-407585-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) SLC25A20 | sc-407585-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC25A20 codifica la translocasa carnitina–acilcarnitina (CACT), un transportador de la membrana mitocondrial interna que intercambia acilcarnitinas por carnitina libre para permitir la importación de ácidos grasos de cadena larga destinados a la β‑oxidación. Este paso de transporte vincula la lanzadera de carnitina con el metabolismo energético mitocondrial y favorece la producción de ATP a partir de sustratos lipídicos, especialmente en tejidos de alta demanda energética. La alteración de SLC25A20 perturba la oxidación de ácidos grasos y puede modificar los perfiles de acilcarnitinas, el equilibrio redox y la señalización metabólica posterior. Las variantes en SLC25A20 se asocian con errores innatos del metabolismo que implican un uso deficiente de ácidos grasos de cadena larga, lo que lo convierte en una diana útil para estudiar el transporte mitocondrial, las respuestas al estrés metabólico y las redes de catabolismo lipídico.
SLC25A20 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SLC25A20 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SLC25A20. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SLC25A20. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SLC25A20 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.