Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
SLC13A5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407118
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- SLC13A5 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico SLC13A5, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SLC13A5 Anticuerpo (2G4): sc-293277
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
SLC13A5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407118 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
SLC13A5 codifica un transportador de citrato dependiente de sodio (NaCT) que media la captación celular de citrato, vinculando la disponibilidad extracelular de citrato con el flujo de carbono intracelular. Al influir en las reservas de citrato citosólico, SLC13A5 favorece la generación de acetil-CoA para la lipogénesis de novo y la acetilación de proteínas, y puede modular redes de detección energética que coordinan la glucólisis, la anaplerosis del ciclo TCA y el equilibrio redox. La actividad de SLC13A5 se ha estudiado principalmente en tejidos metabólicamente activos y en neuronas, donde el transporte de citrato se cruza con el metabolismo mitocondrial y la regulación epigenética a través de vías dependientes de la acetilación. La alteración genética de SLC13A5 se ha asociado con disfunción neurometabólica y con cambios en la homeostasis de lípidos y glucosa, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos de fenotipos metabólicos y neuronales.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO SLC13A5 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SLC13A5 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SLC13A5 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SLC13A5 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SLC13A5.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SLC13A5 para la investigación de la señalización de SLC13A5, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de SLC13A5 críticos para la función de SLC13A5
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SLC13A5 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido SLC13A5 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SLC13A5 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SLC13A5. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SLC13A5 (h) y el plásmido HDR SLC13A5 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SLC13A5 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SLC13A5 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.