SLAMF1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (canine): sc-437301

Descripción general

SLAMF1 (CD150) es un inmunorreceptor de superficie celular de la familia SLAM, expresado principalmente en linfocitos T y B activados, células dendríticas y otras poblaciones hematopoyéticas, donde coordina la formación de la sinapsis inmunológica y modula la producción de citocinas. Mediante unión homotípica e interacciones con adaptadores como SAP/SH2D1A y quinasas aguas abajo, SLAMF1 influye en redes de señalización que convergen con la activación del TCR/BCR y con las vías MAPK, PI3K–AKT y NF-κB para moldear la activación y diferenciación de los linfocitos. En inmunología canina, SLAMF1 sirve como marcador de activación inmunitaria y puede afectar las respuestas antivirales, el diálogo entre leucocitos y la regulación de la inflamación. Las alteraciones en la señalización de SLAMF1 se han vinculado, de manera general, con la desregulación inmunitaria y fenotipos linfoproliferativos, lo que lo hace relevante para estudios mecanísticos de la defensa del huésped y modelos de enfermedades mediadas por el sistema inmune.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SLAMF1 (canine) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen en líneas celulares canine. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SLAMF1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en para la investigación de la señalización de SLAMF1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de críticos para la función de SLAMF1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SLAMF1 CRISPR/Cas9 KO (canine) y el plásmido SLAMF1 CRISPR/Cas9 KO (canine2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus . Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SLAMF1 (canine) y el plásmido HDR SLAMF1 (canine2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.