Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Six2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422957
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Six2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Six2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Six2 Anticuerpo (H-4): sc-377193
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Six2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422957 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Six2 (SIX homeobox 2) es un factor de transcripción con dominio homeobox que regula las decisiones de destino celular durante el desarrollo embrionario, con funciones destacadas en la organogénesis renal y en el mantenimiento de las poblaciones de progenitores de nefrona. Actúa dentro de redes transcripcionales que interactúan con las vías de señalización WNT/β-catenina, FGF y BMP para equilibrar la autorrenovación y la diferenciación de los progenitores. En modelos murinos, la alteración de la actividad de Six2 interfiere con la nefrogénesis y puede dar lugar a anomalías congénitas del riñón y del tracto urinario, por lo que es un gen clave para el estudio de las vías del desarrollo. Six2 también se utiliza como marcador y regulador en estudios de trazado de linaje y de diferenciación de progenitores renales y mesenquimales.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Six2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Six2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Six2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Six2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Six2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Six2 para la investigación de la señalización de Six2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Six2 críticos para la función de Six2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Six2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Six2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Six2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Six2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Six2 (m) y el plásmido HDR Six2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Six2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Six2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.