Plásmido Doble Nickase (m) SIRT2: sc-425703-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)SIRT2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SIRT2 (m) y el plásmido de doble nickasa SIRT2 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Sirt2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SIRT2 Anticuerpo (A-5): sc-28298
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) SIRT2 | sc-425703-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen murino **Sirt2** codifica la desacetilasa dependiente de **NAD⁺** **SIRT2**, una sirtuina predominantemente citosólica que también se trasloca al núcleo y regula la acetilación de sustratos clave, entre ellos la **α-tubulina** y las **histonas**. Mediante el control de la dinámica de los microtúbulos, la progresión del ciclo celular, la organización de la cromatina y la señalización metabólica sensible al estrés, SIRT2 influye en procesos como la fidelidad mitótica, la señalización inflamatoria y la homeostasis neuronal. La actividad de SIRT2 se intersecta con vías vinculadas al sensor de energía y a la proteostasis, incluido el diálogo cruzado con programas asociados a **FOXO** y **NF-κB**, y la regulación de estados de acetilación proteica que afectan la autofagia y las respuestas al estrés oxidativo. La alteración de la expresión o la función de SIRT2 se ha estudiado en el contexto de la neurodegeneración, la disfunción metabólica y fenotipos relacionados con el cáncer, lo que la convierte en un nodo útil para estudios mecanísticos en modelos murinos y células primarias.
SIRT2 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Sirt2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Sirt2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Sirt2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Sirt2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.