Plásmido Doble Nickase (h) Sialyltransferase 7A: sc-406723-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Sialyltransferase 7A consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Sialyltransferase 7A (h) y el plásmido de doble nickasa Sialyltransferase 7A (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ST6GALNAC1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Sialyltransferase 7A | sc-406723-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Sialyltransferase 7A | sc-406723-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ST6GALNAC1 codifica la sialiltransferasa 7A, una glicosiltransferasa residente en el aparato de Golgi que transfiere ácido siálico a O‑glicanos que contienen GalNAc para generar estructuras α2,6‑sialiladas como el sialil‑Tn. Al modular la O‑glicosilación de tipo mucina, influye en el tráfico de glicoproteínas, las interacciones célula–célula y célula–matriz, y la señalización mediada por lectinas dentro de las vías de sialilación y biosíntesis de glicoconjugados. La actividad alterada de ST6GALNAC1 se asocia con patrones aberrantes de glicanos observados en la biología epitelial y el reconocimiento inmunitario. La desregulación de la sialilación de O‑glicanos se ha vinculado a cambios en la adhesión, fenotipos relacionados con la invasión y glicoeepítopos asociados a tumores en múltiples contextos de cáncer, lo que respalda su relevancia en estudios de mecanismos de enfermedad centrados en la glicómica.
Sialyltransferase 7A El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ST6GALNAC1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ST6GALNAC1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ST6GALNAC1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ST6GALNAC1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.