Sialyltransferase 7A Double Nickase Plasmid (h): sc-406723-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Sialyltransferase 7A Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Sialyltransferase 7A Double-Nickase-Plasmid (h) und Sialyltransferase 7A Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf ST6GALNAC1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Sialyltransferase 7A Double Nickase Plasmid (h) | sc-406723-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Sialyltransferase 7A Double Nickase Plasmid (h2) | sc-406723-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ST6GALNAC1 kodiert die Sialyltransferase 7A, eine im Golgi-Apparat lokalisierte Glykosyltransferase, die Sialinsäure auf GalNAc-haltige O-Glykane überträgt und dadurch α2,6-sialylierte Strukturen wie Sialyl-Tn erzeugt. Durch die Prägung der Muzin-typischen O-Glykosylierung beeinflusst sie den Transport von Glykoproteinen, Zell-Zell- und Zell-Matrix-Interaktionen sowie lektinvermittelte Signalwege innerhalb der Sialylierungs- und Glykokonjugat-Biosynthesewege. Eine veränderte ST6GALNAC1-Aktivität wird mit aberranten Glykanmustern in der Epithelbiologie und der Immunerkennung in Verbindung gebracht. Dysregulierte O-Glykan-Sialylierung wurde in mehreren Krebs-Kontexten mit Veränderungen der Adhäsion, invasionsassoziierten Phänotypen und tumorassoziierten Glykoepitopen verknüpft und unterstreicht damit ihre Relevanz für glykomikorientierte Studien zu Krankheitsmechanismen.
Sialyltransferase 7A Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des ST6GALNAC1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von ST6GALNAC1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die ST6GALNAC1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit ST6GALNAC1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.