SHBG Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402099

Descripción general

La globulina fijadora de hormonas sexuales (SHBG) es una glucoproteína plasmática secretada que se une a andrógenos y estrógenos y los transporta, regulando así la fracción libre de esteroides circulantes y modulando la disponibilidad hormonal para los tejidos diana. Al amortiguar la distribución de esteroides e influir en la entrega de hormonas a las células, la SHBG contribuye a la homeostasis endocrina y a programas transcripcionales sensibles a esteroides que configuran la fisiología metabólica y reproductiva. La variación en la expresión o la función de la SHBG se ha vinculado con una biodisponibilidad alterada de esteroides sexuales y se estudia con frecuencia en relación con rasgos metabólicos y con la biología de enfermedades dependientes de hormonas, incluidos el metabolismo glucolipídico desregulado y fenotipos endocrinos reproductivos. Se emplean modelos in vitro e in vivo de perturbación de SHBG para dilucidar mecanismos que conectan el transporte de esteroides con redes de señalización posteriores y cambios en la expresión génica en el hígado y en tejidos periféricos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SHBG (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SHBG en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SHBG junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SHBG tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SHBG.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SHBG para la investigación de la señalización de SHBG, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SHBG críticos para la función de SHBG
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SHBG para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SHBG CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SHBG CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SHBG. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SHBG (h) y el plásmido HDR SHBG (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SHBG para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SHBG definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.