Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SH3BGRL Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406958
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- SH3BGRL El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico SH3BGRL, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SH3BGRL Anticuerpo (E-5): sc-377108
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
SH3BGRL Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406958 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
SH3BGRL (proteína similar a la proteína rica en glutamato con unión al dominio SH3) codifica una pequeña proteína tipo adaptadora que puede modular interacciones proteína–proteína que involucran complejos de señalización con dominios SH3. Se ha relacionado con la regulación de la dinámica del citoesqueleto, la señalización sensible al estado redox y vías asociadas al estrés que influyen en las decisiones de crecimiento y supervivencia celular. Se han reportado alteraciones en la expresión de SH3BGRL en múltiples contextos tumorales, y se ha estudiado su relación con el comportamiento invasivo y con cambios en la señalización proliferativa. Estas características hacen que SH3BGRL sea relevante para estudios mecanísticos de transducción de señales, regulación del estado celular y reconfiguración de vías en modelos de enfermedad.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO SH3BGRL (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SH3BGRL en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SH3BGRL junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SH3BGRL tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SH3BGRL.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SH3BGRL para la investigación de la señalización de SH3BGRL, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de SH3BGRL críticos para la función de SH3BGRL
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SH3BGRL para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido SH3BGRL CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SH3BGRL CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SH3BGRL. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SH3BGRL (h) y el plásmido HDR SH3BGRL (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SH3BGRL para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SH3BGRL definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.