Plásmido CRISPR de Activación (h) Sgo2: sc-404058-ACT

El gen humano **SGO2** codifica la shugoshina 2 (Sgo2), un protector del cohesín asociado al centrómero que ayuda a mantener la cohesión entre cromátidas hermanas y una segregación cromosómica precisa durante la mitosis y la meiosis. Sgo2 actúa dentro de la regulación del cinetocoro–centrómero, coordinándose con señales dependientes de fosfatasas para oponerse a la liberación prematura del cohesín y favorecer el acoplamiento correcto del huso y la fidelidad del punto de control. La alteración de la dinámica de cohesión regulada por SGO2 puede promover la inestabilidad cromosómica y la aneuploidía, procesos que con frecuencia se implican en la biología tumoral y en trastornos del desarrollo. En consecuencia, **SGO2** se estudia en vías que conectan el control del ciclo celular, las respuestas al daño del ADN y el mantenimiento del genoma.

Sgo2 El plásmido de activación CRISPR (h) proporciona un enfoque específico y no destructivo para regular al alza la expresión endógena de SGO2 sin alterar la secuencia de ADN subyacente.

Sgo2 El plásmido de activación CRISPR (h) es un sistema mediador de activación sinérgica (SAM) de tres plásmidos diseñado para la regulación al alza transcripcional altamente eficiente y específica del locus SGO2 en líneas celulares humanas. El sistema se basa en una Cas9 catalíticamente inactiva (dCas9) que porta dos mutaciones inactivadoras (D10A y N863A) que eliminan la actividad nucleasa al tiempo que conservan la unión al ADN. Esta dCas9 se fusiona con VP64, un potente activador transcripcional, y se coexpresa con un gen de resistencia a la blasticidina para la selección. El segundo plásmido codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1, un complejo activador secundario que actúa en conjunto con dCas9-VP64, junto con un gen de resistencia a la higromicina. El tercer plásmido codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 que reclutan el complejo MS2-p65-HSF1 al sitio de activación, acompañado de un gen de resistencia a la puromicina. Los tres plásmidos se administran en una proporción de masa de 1:1:1 para una expresión equilibrada de todos los componentes del sistema.

Una vez ensamblado en el locus diana, el complejo SAM se une aproximadamente 200 pb aguas arriba del sitio de inicio transcripcional SGO2, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma coordinada para reclutar la maquinaria transcripcional e impulsar la regulación al alza de la expresión endógena de Sgo2. A diferencia de la Cas9 con actividad nucleasa, dCas9 no introduce roturas de doble cadena ni modifica la secuencia genómica, preservando el locus nativo SGO2 y permitiendo el estudio de las respuestas transcripcionales dependientes de Sgo2 en el locus endógeno, lo que la convierte en una herramienta valiosa para estudios funcionales, la identificación de genes diana y la modelización de la restauración de la vía Sgo2 en células tumorales con expresión de SGO2 silenciada o reducida.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.