Plásmido Doble Nickase (h) SG2NA: sc-405152-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)SG2NA consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SG2NA (h) y el plásmido de doble nickasa SG2NA (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a STRN3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SG2NA Anticuerpo (S68): sc-13562
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) SG2NA | sc-405152-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) SG2NA | sc-405152-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
STRN3 codifica la estriatina-3 (SG2NA), un miembro de la familia de estriatinas de proteínas andamiaje con repeticiones WD que organizan ensamblajes de señalización multiproteicos. SG2NA participa en complejos relacionados con STRIPAK y favorece la regulación espacial de fosfatasas y quinasas de serina/treonina, conectando la señalización asociada a membrana con la remodelación del citoesqueleto y el tráfico vesicular. A través de estas interacciones, STRN3 puede influir en vías que controlan la polaridad celular, la migración y la progresión del ciclo celular, y su desregulación se ha investigado en contextos en los que una arquitectura anómala de redes de señalización contribuye a fenotipos tumorigénicos. STRN3 también se estudia por su papel en la modulación de la señalización sensible al estrés y la dinámica de complejos proteicos en distintos compartimentos subcelulares.
SG2NA El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus STRN3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de STRN3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de STRN3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con STRN3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.