SG2NA Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405152-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SG2NAO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SG2NA (h) e o Plasmídeo Double Nickase SG2NA (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para STRN3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SG2NA Anticorpo (S68): sc-13562
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SG2NA Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405152-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SG2NA Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405152-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
STRN3 codifica a estriatina-3 (SG2NA), um membro da família das estriatinas, composta por proteínas de andaime (scaffold) com repetições WD que organizam complexos multiproteicos de sinalização. A SG2NA participa de complexos relacionados ao STRIPAK e contribui para a regulação espacial de fosfatases e quinases de serina/treonina, conectando a sinalização associada à membrana à remodelação do citoesqueleto e ao tráfego vesicular. Por meio dessas interações, o STRN3 pode influenciar vias que controlam a polaridade celular, a migração e a progressão do ciclo celular, e sua desregulação tem sido investigada em contextos nos quais uma arquitetura anômala de redes de sinalização contribui para fenótipos tumorigênicos. O STRN3 também é estudado por seus papéis na modulação da sinalização responsiva ao estresse e na dinâmica de complexos proteicos entre compartimentos subcelulares.
SG2NA O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus STRN3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de STRN3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função STRN3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com STRN3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.