SEZ6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422895

Descripción general

Sez6 codifica el homólogo 6 relacionado con las convulsiones (SEZ6), una proteína transmembrana de tipo I enriquecida en el sistema nervioso que contribuye a la diferenciación neuronal, la arborización dendrítica y la formación de sinapsis. SEZ6 participa en vías de tráfico de membrana y de procesamiento proteolítico, incluida la liberación del ectodominio (ectodomain shedding), que puede influir en la señalización célula–célula y en programas de crecimiento de neuritas. En modelos murinos, la alteración de la expresión o la función de Sez6 se ha vinculado a cambios en la conectividad sináptica y en el equilibrio excitatorio/inhibitorio, lo que respalda su relevancia para fenotipos del neurodesarrollo y relacionados con convulsiones. Como regulador asociado a la superficie neuronal, SEZ6 se estudia con frecuencia en el contexto de la maduración de circuitos y la plasticidad dependiente de la actividad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SEZ6 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Sez6 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Sez6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Sez6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SEZ6.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Sez6 para la investigación de la señalización de SEZ6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Sez6 críticos para la función de SEZ6
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Sez6 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SEZ6 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido SEZ6 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Sez6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SEZ6 (m) y el plásmido HDR SEZ6 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Sez6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Sez6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.