Serglycin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422394

Descripción general

Srgn codifica la serglicina, un proteoglucano enriquecido en células hematopoyéticas que actúa como andamiaje para el empaquetamiento y el almacenamiento de proteasas, quimiocinas y otros mediadores bioactivos dentro de los gránulos secretores. En las células inmunitarias de ratón, la serglicina contribuye a la biogénesis de los gránulos, la exocitosis regulada y las interacciones con la matriz extracelular a través de su proteína central modificada con sulfato de condroitina. Estas funciones vinculan a Srgn con vías que controlan las respuestas efectoras de la inmunidad innata y adaptativa, la señalización inflamatoria y la remodelación dependiente de proteasas. Las alteraciones en la biología de la serglicina se han implicado en la activación inmunitaria desregulada y en procesos del microambiente asociados a tumores, lo que respalda su relevancia en estudios mecanísticos de la inflamación y la biología del cáncer.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Serglycin (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Srgn en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Srgn junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Srgn tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Serglycin.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Srgn para la investigación de la señalización de Serglycin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Srgn críticos para la función de Serglycin
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Srgn para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Serglycin CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Serglycin CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Srgn. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Serglycin (m) y el plásmido HDR Serglycin (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Srgn para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Srgn definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.