Septin 9 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403987-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Septin 9O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Septin 9 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Septin 9 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SEPT9. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Septin 9 Anticorpo (2C6): sc-293291
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Septin 9 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403987-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Septin 9 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403987-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SEPT9 codifica a septina 9, uma proteína citosquelética de ligação a GTP que se organiza em filamentos de septinas hetero-oligoméricos e atua como barreira de difusão e andaime para processos associados à actina e aos microtúbulos. A septina 9 contribui para a citocinese, o tráfego vesicular, a polaridade celular e a remodelação de membranas, e tem sido implicada na regulação da progressão mitótica e da arquitetura celular. A alteração da expressão de SEPT9 ou a sua disrupção genómica está associada a defeitos na divisão celular e na organização do citoesqueleto, e a desregulação de SEPT9 tem sido relatada em diversos contextos de cancro e noutros distúrbios que envolvem proliferação aberrante e organização tecidular. Estas propriedades fazem da septina 9 um alvo útil para estudar a dinâmica do citoesqueleto, a fidelidade mitótica e as consequências ao nível das vias resultantes de perturbações na rede de septinas.
Septin 9 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SEPT9 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SEPT9. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SEPT9. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SEPT9 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.