Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Septin 8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422891
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Septin 8 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Septin 8, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Septin 8 Anticorpo (C-5): sc-390074
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Septin 8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422891 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Sept8 codifica a septina 8, uma proteína citosquelética ligante de GTP que se monta em filamentos de septinas hetero-oligoméricos e estruturas em forma de anel, que servem de arcabouço para membranas e organizam a interface actina–microtúbulos. A septina 8 contribui para a citocinese, a polaridade celular e o tráfego de vesículas, além de ajudar a compartimentalizar a sinalização ao formar barreiras de difusão em domínios especializados de membrana. Em neurônios, complexos de septinas que contêm septina 8 estão ligados à morfogênese de neuritos e à organização sináptica, sustentando estudos de desenvolvimento e manutenção de circuitos em modelos murinos. A desregulação da dinâmica da rede de septinas tem sido associada a alterações na divisão celular e na remodelação do citoesqueleto observadas em contextos de pesquisa em câncer e neurodegeneração, tornando o Sept8 um alvo útil para a investigação mecanística de vias.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Septin 8 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Sept8 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Sept8, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Sept8 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Septin 8.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Sept8 para a investigação da sinalização de Septin 8, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Sept8 críticos para a função Septin 8
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Sept8 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Septin 8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Septin 8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Sept8. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Septin 8 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Septin 8 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Sept8 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Sept8 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.