Plasmide Double Nickase (h) Septin 7: sc-401655-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Septin 7 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Septin 7 Double Nickase (h) et le plasmide Septin 7 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SEPT7. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Septin 7 | sc-401655-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **SEPT7** code la septine 7, un composant central des filaments de septines hétéro-oligomériques qui s’assemblent au cortex cellulaire afin d’organiser des domaines membranaires et de coordonner le remodelage du cytosquelette. La septine 7 participe au dialogue entre l’actine et les microtubules, au fonctionnement de l’anneau contractile lors de la cytocinèse, ainsi qu’à des processus de compartimentation qui influencent le trafic vésiculaire, la ciliogenèse et la polarité cellulaire. Par ces fonctions, **SEPT7** affecte des voies qui gouvernent la fidélité de la division cellulaire et la morphogenèse neuronale, et sa dérégulation a été étudiée dans des contextes tels que le comportement des cellules tumorales, des phénotypes neurodéveloppementaux, ou encore la dynamique des barrières cellulaires et des cellules immunitaires. **SEPT7** est fréquemment utilisé comme marqueur et nœud fonctionnel pour étudier l’architecture des échafaudages de septines et la signalisation dépendante du cytosquelette.
Septin 7 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SEPT7 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SEPT7. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SEPT7. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SEPT7.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.