Plásmido Doble Nickase (h) Septin 11: sc-407969-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Septin 11 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Septin 11 (h) y el plásmido de doble nickasa Septin 11 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SEPT11. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Septin 11 | sc-407969-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Septin 11 | sc-407969-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SEPT11 codifica la septina 11, una proteína citoesquelética de unión a GTP que se ensambla en filamentos de septinas hetero-oligoméricos y estructuras similares a anillos que actúan como barreras de difusión y andamios en las membranas. La septina 11 contribuye a la coordinación entre actina y microtúbulos durante la citocinesis, la polarización celular, el tráfico vesicular y la morfología de las neuritas, integrándose con vías que gobiernan la organización cortical y la fidelidad de la división celular. Las alteraciones en la dinámica de la red de septinas y la desregulación de SEPT11 se han investigado en contextos de proliferación y migración aberrantes y en neurobiología, donde la remodelación del citoesqueleto y la compartimentalización de membranas son aspectos centrales. Estas características hacen de SEPT11 un objetivo útil para explorar la comunicación cruzada entre vías del citoesqueleto, la señalización asociada a membranas y los puntos de control estructurales vinculados al ciclo celular en modelos de células humanas.
Septin 11 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SEPT11 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SEPT11. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SEPT11. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SEPT11 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.