Date published: 2026-7-20

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SEMA3F CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-422879

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データシート
  • 対象生物種: mouse
  • 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、~20回トランスフェクション
  • SEMA3F CRISPR/Cas9 ノックアウト(KO)プラスミド(m)は、GeCKO v2ライブラリ由来の配列を用いて最大のノックアウト効率を実現するよう設計された、Cas9ヌクレアーゼおよび標的特異的な20塩基対のガイドRNA(gRNA)をそれぞれコードするプラスミドのプールです
  • gRNA配列は、Cas9を誘導してSEMA3Fゲノム座において部位特異的な二本鎖切断(DSBs)を引き起こし、非相同末端結合(NHEJ)を介して遺伝子ノックアウトをもたらします
  • ピューロマイシン耐性遺伝子とRFP遺伝子はLoxP部位で挟まれているため、安定したノックアウト細胞株を樹立した後、Creリコンビナーゼ(Creベクター:sc-418923)を用いて選択マーカーを除去することができる。
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    注文情報

    製品名カタログ #単位価格数量お気に入り

    SEMA3F CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m)

    sc-422879
    20 µg
    $397.00

    概要

    Sema3fはセマフォリン3F(SEMA3F)をコードしており、SEMA3Fは分泌性のガイダンス因子として、主にニューロピリンおよびプレキシンからなる受容体複合体を介してシグナルを伝え、細胞骨格ダイナミクス、接着、方向性移動を制御します。RhoファミリーGTPase活性とそれに続くアクチン再構築を調節することで、SEMA3Fは軸索誘導、血管パターニング、上皮組織の構築に影響を与えます。免疫・間質微小環境においては、SEMA3F依存的な反発性シグナルが細胞の位置取りや運動性を形作り、インテグリン、MAPK、PI3K経路の出力とも交差します。SEMA3Fシグナルの破綻は、疾患関連モデルにおける血管新生や浸潤性の表現型変化と関連づけられており、発生や腫瘍生物学の機序研究における有用性を支持しています。

    SEMA3F CRISPR/Cas9 KOプラスミド(m)は、mouse細胞株におけるSema3f遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Sema3f内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA(sgRNA)と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

    このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Sema3fのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失(インデル)が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合(NHEJ)経路を通じて修復され、その結果、SEMA3Fタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

    このCRISPRノックアウトシステムにより、SEMA3Fシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Sema3f欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

    主な特徴

    • SEMA3Fの機能に不可欠なSema3fエクソンを標的とするsgRNA
      導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
      トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
      ノックアウト効率を向上させるための、Sema3fゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
      トランスフェクションによる導入に対応

    設計バリエーション

    CRISPRs +/- HDR

    • SEMA3F CRISPR/Cas9 KOプラスミド(m)およびSEMA3F CRISPR/Cas9 KOプラスミド(m2)によってコードされるgRNAは、Sema3f遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
      SEMA3F HDRプラスミド(m)および SEMA3F HDRプラスミド(m2)によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSema3fホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSema3f標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

    研究用のみ。診断用または治療用ではありません。