Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
SEMA3E Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422878
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- SEMA3E El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico SEMA3E, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
SEMA3E Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422878 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen Sema3e de ratón codifica la semaforina-3E (SEMA3E), una señal guía secretada que transmite señales principalmente a través de receptores plexina para controlar el guiado axonal, la migración neuronal y el patrón tisular. SEMA3E modula la dinámica del citoesqueleto y la adhesión celular, intersectando de manera dependiente del contexto con vías que regulan la motilidad, la remodelación angiogénica y el tráfico de células inmunitarias. La desregulación de la señalización SEMA3E–plexina se ha vinculado en la literatura con un desarrollo vascular aberrante y con un comportamiento invasivo alterado en modelos de biología del cáncer, lo que respalda su relevancia para estudios del neurodesarrollo y de la señalización del microambiente.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO SEMA3E (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Sema3e en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Sema3e junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Sema3e tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SEMA3E.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Sema3e para la investigación de la señalización de SEMA3E, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Sema3e críticos para la función de SEMA3E
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Sema3e para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido SEMA3E CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido SEMA3E CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Sema3e. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SEMA3E (m) y el plásmido HDR SEMA3E (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Sema3e para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Sema3e definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.