SEMA3C Plasmide Double Nickase (m): sc-422877-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SEMA3C Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SEMA3C Double Nickase Plasmid (m) e il SEMA3C Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Sema3c. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SEMA3C Plasmide Double Nickase (m) | sc-422877-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SEMA3C Plasmide Double Nickase (m2) | sc-422877-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Sema3c** codifica **SEMA3C**, una semaforina secreta di classe 3 che funge da segnale guida regolando il rimodellamento del citoscheletro, la migrazione cellulare e la strutturazione dei tessuti. SEMA3C segnala principalmente attraverso complessi recettoriali di neuropiline e plessine per modulare le GTPasi della famiglia Rho e vie a valle che influenzano l’adesione e il movimento direzionale. Durante lo sviluppo contribuisce alla guida assonale e alla morfogenesi cardiovascolare, e la disregolazione della segnalazione delle semaforine è spesso studiata in contesti di rimodellamento vascolare anomalo e di comportamento cellulare invasivo. In quanto ligando del microambiente, SEMA3C è inoltre oggetto di studio per i suoi ruoli nelle transizioni epitelio-mesenchimali e nella comunicazione intercellulare in modelli rilevanti per la malattia.
SEMA3C Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Sema3c nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Sema3c. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Sema3c. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Sema3c interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.