Date published: 2026-7-20

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Sec61β CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-425892

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Datenblätter
  • Zielspezies: mouse
  • 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
  • Sec61β Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
  • gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im Sec61β-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
  • Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
  • Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Sec61β: sc-393633
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    Sec61β CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m)

    sc-425892
    20 µg
    $397.00

    Übersicht

    SEC61B kodiert die Beta-Untereinheit des Sec61-Translokons, einer zentralen Komponente des Membrankanals des endoplasmatischen Retikulums (ER), der den kotranslationalen Proteinimport und die Integration neu entstehender Polypeptide in den sekretorischen Weg vermittelt. In Mauszellen unterstützt Sec61β die Biogenese von ER-Proteinen, koordiniert das Andocken von Ribosomen und trägt zu ER-Proteostase-Prozessen bei, die mit Faltung und ER-assoziiertem Abbau (ERAD) verknüpft sind. Eine veränderte Translokon-Funktion kann Sekretion, die Homöostase von Membranproteinen und die Signalgebung der Antwort auf ungefaltete Proteine (Unfolded Protein Response, UPR) stören und stellt damit einen Zusammenhang zwischen der Aktivität des SEC61-Komplexes und der zellulären Anpassung an Stress her. Da die Integrität des sekretorischen Weges grundlegende Bedeutung für Immunsignale, den Stoffwechsel und neuronale Funktionen hat, wird Sec61b häufig im Kontext von Proteostase-Ungleichgewichten und stressassoziierten Krankheitsmechanismen untersucht.

    Das Sec61β CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Sec61b-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Sec61b-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

    Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Sec61b nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Sec61β-Proteinexpression aufheben.

    Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Sec61b-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Sec61β-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

    Hauptmerkmale

    • sgRNAs, die auf Sec61b-Exone abzielen, die für die Sec61β-Funktion entscheidend sind
      Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
      GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
      Pool von Plasmiden, die auf mehrere Sec61b-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
      Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

    Designvarianten

    CRISPRs +/- HDRs

    • gRNAs, die vom Sec61β CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Sec61β CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Sec61b-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
      HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Sec61β HDR-Plasmid (m) und Sec61β HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Sec61b-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Sec61b-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

    Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.