Sec61β CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-425892

개요

SEC61B는 Sec61 트랜스로콘의 베타 소단위를 암호화하며, 이는 소포체(ER) 막 채널의 핵심 구성요소로서 번역과 동시에 단백질을 ER로 수입하고 새로 합성되는 폴리펩타이드를 분비 경로에 통합시키는 과정을 매개합니다. 마우스 세포에서 Sec61β는 ER 단백질 생합성을 지원하고 리보솜 도킹과 협조하며, 접힘과 ER-연관 분해(ERAD)와 연결된 ER 단백질 항상성(프로테오스타시스) 과정에도 기여합니다. 트랜스로콘 기능이 변하면 분비, 막 단백질 항상성, 그리고 미접힘 단백질 반응(UPR) 신호전달이 교란될 수 있어, SEC61 복합체의 활성은 세포의 스트레스 적응과 연관됩니다. 분비 경로의 무결성은 면역 신호, 대사, 신경 기능의 기반이 되므로, Sec61b는 프로테오스타시스 불균형과 스트레스 관련 질환 기전의 맥락에서 자주 연구됩니다.

Sec61β CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Sec61b 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Sec61b 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Sec61b의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Sec61β 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Sec61β 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Sec61b 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Sec61β 기능에 중요한 Sec61b 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Sec61b 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Sec61β CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Sec61β CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Sec61b 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Sec61β HDR 플라스미드 (m) 및 Sec61β HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Sec61b 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Sec61b 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.