Sec5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405088-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Sec5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Sec5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Sec5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EXOC2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Sec5 Anticorpo (F-7): sc-393230
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Sec5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405088-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Sec5 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405088-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O EXOC2 humano codifica a Sec5, uma subunidade essencial do complexo exocisto octamérico de ancoragem, que coordena espacialmente o acoplamento e a fusão de vesículas secretoras na membrana plasmática. A Sec5 integra sinais de pequenas GTPases, incluindo RalA/RalB, para acoplar o tráfego vesicular à exocitose polarizada, à remodelação de membrana e à entrega direcionada de receptores e moléculas de adesão. Por meio dessas funções, o EXOC2 contribui para processos como migração celular, citocinese e manutenção da polaridade epitelial, e sua desregulação tem sido associada a alterações de sinalização ligadas à transformação oncogênica e ao comportamento invasivo. A Sec5 também tem sido utilizada para investigar como o tráfego dependente do exocisto molda a reciclagem de receptores e a organização de vias de sinalização em diversos tipos de células humanas.
Sec5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EXOC2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EXOC2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EXOC2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EXOC2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.