Plásmido Doble Nickase (h) SCGF: sc-411000-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)SCGF consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SCGF (h) y el plásmido de doble nickasa SCGF (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CLEC11A. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) SCGF | sc-411000-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) SCGF | sc-411000-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CLEC11A codifica el factor de crecimiento de células madre (SCGF), una citocina secretada de la familia de lectinas tipo C implicada en el mantenimiento de las células madre y progenitoras hematopoyéticas y en la señalización del nicho estromal–hematopoyético. SCGF favorece programas de proliferación y supervivencia de progenitores y se estudia con frecuencia en el contexto de la diferenciación regulada por citocinas, la intercomunicación de vías de señalización inflamatoria y la biología del microambiente de la médula ósea. La alteración de la expresión de CLEC11A/SCGF se ha asociado con una hematopoyesis desregulada y con interacciones tumor–estroma, lo que la hace relevante para la investigación del sesgo hacia el linaje mieloide, los fenotipos de fallo medular y la remodelación del microambiente asociada al cáncer. Estas características sitúan a CLEC11A como una diana útil para desentrañar las señales extracelulares que influyen en las decisiones de destino de las células madre y en el desarrollo de células inmunitarias.
SCGF El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CLEC11A en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CLEC11A. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CLEC11A. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CLEC11A alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.