Partículas Lentivirales de Activación (m) SCG10: sc-422814-LAC

Stmn2 codifica SCG10 (también conocida como stathmin-2), una proteína desestabilizadora de microtúbulos enriquecida en neuronas que regula la dinámica de la tubulina, el crecimiento de neuritas y el comportamiento del cono de crecimiento axonal. Al modular el recambio de microtúbulos, SCG10 influye en el transporte intracelular, la polaridad neuronal y la remodelación dependiente de la actividad que sustenta el desarrollo y la conectividad sináptica. La alteración de la expresión y el procesamiento de STMN2/SCG10 se ha relacionado con respuestas al estrés neuronal y con un mantenimiento axonal perturbado, lo que la hace relevante para estudios de neurodegeneración y lesión de nervio periférico. En modelos murinos, la perturbación de Stmn2 se utiliza comúnmente para investigar programas de remodelación del citoesqueleto que moldean la formación de circuitos y la resiliencia neuronal.

Las partículas de activación lentiviral SCG10 (m) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de Stmn2 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral SCG10 (m) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción Stmn2, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de SCG10. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo Stmn2 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.