SCG10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2): sc-422814-KO-2
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SCG10 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m2) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SCG10, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SCG10 Anticorpo (2-RE19): sc-135620
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SCG10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) | sc-422814-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Stmn2 codifica a SCG10, um membro da família das estatminas enriquecido em neurônios, que se liga à tubulina e promove a desestabilização dos microtúbulos, dando suporte à remodelação dinâmica do citoesqueleto durante o crescimento de neuritos e a orientação axonal no desenvolvimento do sistema nervoso de camundongos. A atividade de SCG10 influencia o comportamento do cone de crescimento, o tráfego intracelular e a plasticidade dependente de atividade ao acoplar sinais de sinalização à renovação (turnover) de microtúbulos. A desregulação de STMN2/SCG10 tem sido associada a respostas neuronais ao estresse e à manutenção axonal alterada, o que a torna relevante para estudos de neurodegeneração e vulnerabilidade de neurônios motores. Em modelos celulares, a perturbação de SCG10 afeta programas de diferenciação neuronal, fenótipos de regeneração axonal e processos sinápticos dependentes do citoesqueleto.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SCG10 (m2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Stmn2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Stmn2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Stmn2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SCG10.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Stmn2 para a investigação da sinalização de SCG10, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Stmn2 críticos para a função SCG10
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Stmn2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SCG10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SCG10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Stmn2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SCG10 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SCG10 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Stmn2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Stmn2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.