SAPS1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406315

Descripción general

PPP6R1 codifica SAPS1, una subunidad reguladora de la fosfatasa de proteínas 6 (PP6) que ayuda a dirigir la actividad catalítica hacia sustratos específicos y compartimentos subcelulares concretos. Mediante el ensamblaje del complejo PP6, SAPS1 contribuye a programas de desfosforilación de serina/treonina que influyen en la progresión del ciclo celular, la organización del huso mitótico y la señalización de la respuesta al daño del ADN. La fosforregulación vinculada a PP6 se cruza con vías activadas por el estrés y el control de puntos de control, moldeando la estabilidad del genoma y la capacidad proliferativa. La desregulación de subunidades reguladoras de PP6 se ha implicado en la alteración de la homeostasis de la fosforilación observada en múltiples contextos patológicos, incluida la reprogramación de la señalización asociada al cáncer.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SAPS1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PPP6R1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PPP6R1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PPP6R1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SAPS1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PPP6R1 para la investigación de la señalización de SAPS1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de PPP6R1 críticos para la función de SAPS1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PPP6R1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SAPS1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SAPS1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PPP6R1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SAPS1 (h) y el plásmido HDR SAPS1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PPP6R1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PPP6R1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.