Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) SAP 97: sc-400865-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SAP 97 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SAP 97 Double Nickase (h) et le plasmide SAP 97 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DLG1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SAP 97 Antibody (2D11): sc-9961
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SAP 97 | sc-400865-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SAP 97 | sc-400865-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DLG1 code la protéine 97 associée aux synapses (SAP97), une protéine d’échafaudage de type guanylate kinase associée à la membrane (MAGUK) qui organise des complexes multiprotéiques aux jonctions cellule–cellule et aux synapses neuronales. SAP97 coordonne le trafic et la stabilisation des récepteurs ionotropes du glutamate et d’autres canaux, en les reliant à des composants du cytosquelette et de la signalisation afin de moduler la force synaptique et la polarité. Grâce à des interactions médiées par ses domaines PDZ, SH3 et GK, SAP97 intègre des modules de signalisation impliqués dans l’adhésion, l’excitabilité et le remodelage des jonctions. Des altérations de l’expression ou de la localisation de DLG1/SAP97 ont été étudiées dans des contextes de phénotypes neurodéveloppementaux et neuropsychiatriques, ainsi que de perturbation de la polarité épithéliale et de modifications associées aux tumeurs des voies d’adhésion cellulaire.
SAP 97 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DLG1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DLG1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DLG1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DLG1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.