SAP 18 Lentiviral Activation Particles (h): sc-404214-LAC

SAP18 (SAP 18) kodiert eine zentrale Komponente der transkriptionellen Repressionsmaschinerie, die mit Histondeacetylierung und Chromatin-Remodeling zusammenwirkt, um Genexpressionsprogramme zu modulieren. SAP18 assoziiert mit dem Sin3/HDAC-Komplex und trägt zur epigenetischen Kontrolle von Zellzyklusprogression, Differenzierung und stressresponsiver Transkription bei. Über diese Interaktionen hilft SAP18, Signalwege zu koordinieren, die die RNA-Prozessierung und transkriptionelle Outputs im Zusammenhang mit Genomstabilität steuern. Eine fehlregulierte, SAP18-abhängige Repression wurde im Kontext aberranter Chromatinzustände untersucht, die für die Krebsbiologie und andere Erkrankungen mit veränderter epigenetischer Regulation relevant sind.

SAP 18 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente SAP18-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

SAP 18 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der SAP18-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen SAP 18-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen SAP18-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.