SAMD4A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406449

Visão geral

SAMD4A (sterile alpha motif domain containing 4A) é uma proteína reguladora que se liga a RNA, implicada no controlo pós-transcricional da expressão génica através do reconhecimento de motivos específicos em mRNAs-alvo. Participa na estabilidade, localização e repressão translacional de mRNAs, ligando a atividade da SAMD4A a transições de estado celular e a programas adaptativos ao stress que remodelam o proteoma. Por meio destas funções, a SAMD4A pode influenciar vias que governam a proliferação, a diferenciação e os outputs de sinalização relacionados com a resposta imunitária, ao modular a tradução de componentes dessas vias. Alterações na regulação da SAMD4A têm sido estudadas no contexto de programas de expressão génica associados ao cancro e de fenótipos inflamatórios, nos quais o metabolismo de RNA desregulado contribui para comportamentos celulares relevantes para a doença.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SAMD4A (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SAMD4A em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SAMD4A, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SAMD4A na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SAMD4A.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SAMD4A para a investigação da sinalização de SAMD4A, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SAMD4A críticos para a função SAMD4A
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SAMD4A para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo SAMD4A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SAMD4A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SAMD4A. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo SAMD4A Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SAMD4A (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SAMD4A para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SAMD4A definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.