SAMC Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-414066
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- SAMC El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico SAMC, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
SAMC Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-414066 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen humano SLC25A26 codifica SAMC (transportador mitocondrial de S-adenosilmetionina), un transportador de la membrana interna mitocondrial que importa S-adenosilmetionina a la matriz para sostener las reacciones de metilación mitocondriales. Al suministrar SAM a metiltransferasas de ARN, proteínas y metabolitos, SAMC respalda la expresión génica mitocondrial, la homeostasis de la fosforilación oxidativa y la adaptación metabólica ligada al estado redox. La alteración del transporte mitocondrial de SAM perturba la coordinación del metabolismo de un carbono entre el citosol y las mitocondrias y puede modificar el procesamiento de mtADN/ARN y la función de la cadena respiratoria. Se han asociado variantes que afectan la actividad de SLC25A26 con fenotipos de disfunción mitocondrial, lo que hace que este gen sea relevante para estudios mecanísticos de la biología de las enfermedades mitocondriales y de las respuestas al estrés metabólico.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO SAMC (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SLC25A26 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SLC25A26 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SLC25A26 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SAMC.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SLC25A26 para la investigación de la señalización de SAMC, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de SLC25A26 críticos para la función de SAMC
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SLC25A26 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido SAMC CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SAMC CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SLC25A26. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SAMC (h) y el plásmido HDR SAMC (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SLC25A26 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SLC25A26 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.