Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SA-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423170
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- SA-1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico SA-1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SA-1 Anticuerpo (A-9): sc-365061
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
SA-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423170 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Mouse Stag1 codifica SA-1, un componente central del complejo cohesina que controla la cohesión de las cromátidas hermanas, la organización de la cromatina de orden superior y la segregación cromosómica precisa durante la mitosis y la meiosis. SA-1 contribuye a la estabilidad del genoma y a la regulación transcripcional al modular los bucles de cromatina de largo alcance y coordinar los procesos de replicación y reparación del ADN. A través de estas funciones, STAG1 se relaciona con los puntos de control del ciclo celular y las vías de respuesta al daño en el ADN, lo que lo hace relevante para estudios de aneuploidía, inestabilidad cromosómica y fenotipos del desarrollo asociados a la cohesina. La alteración o desregulación de subunidades de la cohesina, incluida SA-1, se investiga con frecuencia en el contexto de programas de expresión génica modificados y la biología tumoral, sin implicar resultados clínicos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO SA-1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Stag1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Stag1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Stag1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SA-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Stag1 para la investigación de la señalización de SA-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Stag1 críticos para la función de SA-1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Stag1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido SA-1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido SA-1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Stag1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SA-1 (m) y el plásmido HDR SA-1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Stag1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Stag1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.