Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SA-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423170
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SA-1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SA-1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SA-1 Anticorpo (A-9): sc-365061
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SA-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423170 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Stag1 de camundongo codifica a SA-1, um componente central do complexo de coesina que controla a coesão entre cromátides-irmãs, a organização da cromatina em níveis superiores e a segregação cromossômica precisa durante a mitose e a meiose. A SA-1 contribui para a estabilidade do genoma e para a regulação transcricional ao modular o looping de cromatina de longa distância e ao coordenar processos de replicação e reparo do DNA. Por meio dessas funções, a STAG1 se relaciona com checkpoints do ciclo celular e vias de resposta a dano no DNA, tornando-a relevante para estudos de aneuploidia, instabilidade cromossômica e fenótipos de desenvolvimento associados à coesina. A ruptura ou desregulação de subunidades da coesina, incluindo a SA-1, é frequentemente investigada no contexto de programas de expressão gênica alterados e da biologia tumoral, sem implicar desfechos clínicos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SA-1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Stag1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Stag1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Stag1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SA-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Stag1 para a investigação da sinalização de SA-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Stag1 críticos para a função SA-1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Stag1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SA-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SA-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Stag1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SA-1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SA-1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Stag1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Stag1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.