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RUNX3双切口酶质粒(h) | sc-401377-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RUNX3双切口酶质粒(h2) | sc-401377-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RUNX3(Runt 相关转录因子 3)是 RUNX 家族的一种 DNA 结合型转录因子,可与 CBFB 形成异源二聚体,从而调控谱系决定、分化以及细胞周期控制。在人体组织中,RUNX3 整合来自 TGF-β/SMAD 信号通路的调控信息,并与 Wnt/β-连环蛋白及免疫相关的转录程序发生交叉作用,以调节上皮稳态和炎症反应。RUNX3 的表达或功能异常与凋亡和分化失调有关,并已在多项有关胃肠道恶性肿瘤、乳腺癌及免疫疾病的研究中被报道。作为一种具有情境依赖性的转录网络调控因子,RUNX3 常被用于探究肿瘤抑制机制、上皮—免疫串扰以及发育相关的基因调控。
RUNX3 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 RUNX3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对RUNX3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏RUNX3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了RUNX3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。