RP1L1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405790

Descripción general

RP1L1 (RP1-like 1) codifica una proteína asociada a los microtúbulos, enriquecida en las células fotorreceptoras, donde contribuye a la organización y estabilidad del citoesqueleto axonemal dentro del cilio conector y el segmento externo. A través de su asociación con los microtúbulos y la arquitectura ciliar, RP1L1 contribuye a la morfogénesis de los fotorreceptores, la alineación de los discos del segmento externo y los procesos de transporte esenciales para la fototransducción. La alteración de la función de RP1L1 se ha vinculado a degeneraciones retinianas hereditarias, incluidas la distrofia macular y fenotipos relacionados, lo que subraya su papel en el mantenimiento de la estructura de la retina y la integridad de la señalización visual. Por tanto, RP1L1 es relevante para estudiar la regulación citoesquelética dependiente de cilios, el transporte proteico compartimentalizado y los mecanismos de vulnerabilidad de los fotorreceptores.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO RP1L1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RP1L1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RP1L1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RP1L1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína RP1L1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RP1L1 para la investigación de la señalización de RP1L1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de RP1L1 críticos para la función de RP1L1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RP1L1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido RP1L1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido RP1L1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RP1L1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR RP1L1 (h) y el plásmido HDR RP1L1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RP1L1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RP1L1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.