RNPS1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-422692

Übersicht

Das murine Gen Rnps1 kodiert RNPS1, ein konserviertes RNA-bindendes Protein, das an der prä-mRNA‑Spleißung und der mRNP‑Überwachung nach dem Spleißen beteiligt ist. RNPS1 wirkt bei Prozessen mit, die mit dem Exon‑Junction‑Komplex (EJC) assoziiert sind, und unterstützt den nonsense‑vermittelten mRNA‑Abbau (NMD), wodurch es die Qualitätskontrolle von Transkripten, den mRNA‑Export und die Translationskompetenz beeinflusst. Durch diese Aktivitäten trägt RNPS1 zur Aufrechterhaltung der Proteom‑Integrität bei und reguliert Genexpressionsprogramme, die mit Zellzyklus‑Progression und Stressantworten verknüpft sind. Eine Fehlregulation von Spleiß- und mRNA‑Überwachungswegen wird breit mit neuroentwicklungsbedingten Phänotypen und der krebsassoziierten Umgestaltung des Transkriptoms in Verbindung gebracht, was RNPS1 zu einem geeigneten Ansatzpunkt für mechanistische Studien der RNA‑Prozessierung macht.

Das RNPS1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Rnps1-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Rnps1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Rnps1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die RNPS1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Rnps1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der RNPS1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Rnps1-Exone abzielen, die für die RNPS1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Rnps1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom RNPS1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom RNPS1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Rnps1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das RNPS1 HDR-Plasmid (m) und RNPS1 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Rnps1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Rnps1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.