RNPS1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422692

Descripción general

El gen Rnps1 de ratón codifica RNPS1, una proteína conservada de unión a ARN que funciona en el empalme (splicing) del pre-ARNm y en la vigilancia de los complejos mRNP tras el empalme. RNPS1 participa en procesos asociados al complejo de unión de exones (EJC) y favorece la degradación del ARNm mediada por codones sin sentido (NMD), influyendo en el control de calidad de los transcritos, la exportación de ARNm y la competencia para la traducción. A través de estas actividades, RNPS1 ayuda a mantener la integridad del proteoma y regula programas de expresión génica vinculados a la progresión del ciclo celular y a las respuestas al estrés. La desregulación de las vías de empalme y vigilancia del ARNm se ha implicado ampliamente en fenotipos del neurodesarrollo y en la remodelación del transcriptoma asociada al cáncer, lo que convierte a RNPS1 en un nodo útil para estudios mecanísticos del procesamiento de ARN.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO RNPS1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Rnps1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Rnps1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Rnps1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína RNPS1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Rnps1 para la investigación de la señalización de RNPS1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Rnps1 críticos para la función de RNPS1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Rnps1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido RNPS1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido RNPS1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Rnps1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR RNPS1 (m) y el plásmido HDR RNPS1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Rnps1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Rnps1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.