Partículas Lentivirales de Activación (h) RNF31: sc-412436-LAC
- Especies Diana: human
- 200 µl de Partículas Lentivirales de Activación CRISPR/dCas listas para usar
- Partículas Lentivirales de Acitvación (h) RNF31 es un sistema de activación de la trascripción por mediante una activación sinérgica (SAM), diseñado para incrementar la expresión de un gen determinado a través de la tranducción lentiviral de las células
- Partículas Lentivirales de Acitvación (h) RNF31 incluyen los siguientes elementos activadores SAM: plásmido codificador de la nucleasa Cas 9 desactivada, (D10A y N863A) fusionadas al dominio de transactivación VP64; plásmido codificador de la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 y un plásmido que codifica la secuencia de diana específica de 20 nt de ARN. También contienen genes de resistencia a blasticidina, higromicina y puromicina.
- El complejo SAM resultante se une en un punto específico a unos 200 -250 nt aguas arriba del inicio de la transcripción del gen diana y ofrece un potente punto de reclutamiento de factores de transcripción para un eficiente incremento de la activación génica
- Los gRNA codificados por el RNF31 Plásmido de activación lentiviral (h) y el RNF31 Plásmido de activación lentiviral (h2) se dirigen a regiones reguladoras distintas del promotor RNF31. Puede que haya uno o ambos diseños disponibles
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Partículas Lentivirales de Activación (h) RNF31 | sc-412436-LAC | 200 µl | $455.00 |
El RNF31 humano codifica una ligasa de ubiquitina E3 que actúa como el núcleo catalítico del complejo ensamblador de cadenas de ubiquitina lineal (LUBAC), generando cadenas de ubiquitina unidas a Met1 que moldean la propagación de la señal aguas abajo de los receptores inmunitarios. Mediante la regulación de NF-κB y redes relacionadas de señalización inflamatoria, RNF31 influye en las respuestas de citocinas, la supervivencia celular y programas transcripcionales adaptativos al estrés. La ubiquitinación lineal dependiente de RNF31 modula la estabilidad de complejos proteicos en plataformas de señalización de receptores y contribuye al equilibrio entre vías promotoras de supervivencia y de muerte celular. La actividad desregulada de RNF31 y la señalización de LUBAC se han asociado con inflamación aberrante y contextos de señalización oncogénica, lo que respalda su estudio en inmunidad, apoptosis y biología del cáncer.
Las partículas de activación lentiviral RNF31 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de RNF31 en una gama más amplia de tipos de células humanas.
Las partículas de activación lentiviral RNF31 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción RNF31, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de RNF31. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo RNF31 y la arquitectura reguladora.
El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.