RNF170 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-410169-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RNF170O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RNF170 (h) e o Plasmídeo Double Nickase RNF170 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RNF170. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RNF170 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-410169-NIC | 20 µg | $410.00 |
RNF170 codifica uma ligase E3 de ubiquitina do tipo RING finger, residente no retículo endoplasmático, que dá suporte ao controle de qualidade de proteínas ao promover a ubiquitinação e a degradação proteassomal de determinados substratos associados à membrana. Por meio da degradação associada ao RE (ERAD) e de sinalização dependente de ubiquitina, a RNF170 contribui para a proteostase e pode influenciar vias de cálcio e de resposta ao estresse ligadas à função do RE. Alterações na atividade da RNF170 têm sido associadas à desregulação da sinalização por ubiquitina e foram estudadas no contexto de neurodegeneração e outros distúrbios em que a homeostase do RE está comprometida. Como resultado, a RNF170 é um alvo útil para investigar a especificidade de ligases de ubiquitina, respostas ao estresse do RE e redes de sinalização a jusante em células humanas.
RNF170 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RNF170 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RNF170. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RNF170. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RNF170 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.