Plásmido Doble Nickase (h) RNF157: sc-407283-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)RNF157 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa RNF157 (h) y el plásmido de doble nickasa RNF157 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a RNF157. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) RNF157 | sc-407283-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) RNF157 | sc-407283-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RNF157 codifica una ligasa E3 de ubiquitina con dominio RING finger que contribuye al recambio de proteínas dependiente de ubiquitina y al control de la señalización en células humanas. Mediante su función catalítica en la ubiquitinación, RNF157 puede influir en la proteostasis, las respuestas al estrés y las decisiones sobre el destino celular al modular la estabilidad y la actividad de sustratos aguas abajo. Las ligasas E3 como RNF157 se cruzan con vías que regulan el mantenimiento neuronal y procesos relacionados con la apoptosis, por lo que RNF157 resulta de interés en estudios de neurobiología y de mecanismos de supervivencia celular. La regulación alterada de la vía de la ubiquitina, incluida la desregulación de ligasas E3, se investiga con frecuencia en el contexto de la señalización asociada al cáncer, los mecanismos neurodegenerativos y otras afecciones vinculadas a una homeostasis proteica deficiente.
RNF157 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus RNF157 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de RNF157. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de RNF157. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con RNF157 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.