Plásmido Doble Nickase (h) RNF150: sc-412810-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)RNF150 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa RNF150 (h) y el plásmido de doble nickasa RNF150 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a RNF150. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) RNF150 | sc-412810-NIC | 20 µg | $410.00 |
RNF150 codifica la proteína con dedo RING 150, una presunta ligasa E3 de ubiquitina que contribuye a la regulación dependiente de ubiquitina de la estabilidad proteica y de la señalización. Mediante la modulación de la ubiquitinación de sus sustratos, RNF150 puede influir en la proteostasis, el recambio de proteínas reguladoras y la interacción con vías como el tráfico endosomal y las cascadas de señalización sensibles al estrés. La alteración de la actividad de la vía de la ubiquitina se asocia con frecuencia con una regulación anómala del ciclo celular, señalización inflamatoria y mantenimiento del genoma, lo que hace que RNF150 sea de interés para estudios mecanísticos en estos contextos. La expresión y la variación genómica de RNF150 se han explorado en conjuntos de datos que abarcan múltiples áreas de enfermedad, lo que respalda su utilidad como gen candidato para la anotación funcional y el mapeo de vías en células humanas.
RNF150 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus RNF150 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de RNF150. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de RNF150. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con RNF150 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.