RNF10 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409761

Descripción general

RNF10 codifica una proteína con dedo de zinc tipo RING implicada en la regulación dependiente de ubiquitina de la estabilidad proteica y de la salida de señalización. A través de procesos asociados a ligasas E3, RNF10 se ha vinculado al control de programas transcripcionales, la señalización mediada por receptores y las vías de proteostasis que influyen en el crecimiento y la diferenciación celular. Se han descrito alteraciones en la expresión o regulación de RNF10 en contextos relacionados con la biología neural y cardiovascular, y se estudia su posible contribución a una homeostasis celular desregulada en la enfermedad. Por ello, RNF10 es relevante para investigar cómo la remodelación de las redes de señalización mediada por ubiquitina afecta la expresión génica y las decisiones de destino celular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO RNF10 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RNF10 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RNF10 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RNF10 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína RNF10.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RNF10 para la investigación de la señalización de RNF10, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de RNF10 críticos para la función de RNF10
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RNF10 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido RNF10 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido RNF10 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RNF10. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR RNF10 (h) y el plásmido HDR RNF10 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RNF10 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RNF10 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.