Ribosomal Protein S3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402327

Descripción general

RPS3 codifica la proteína ribosomal S3, un componente central de la subunidad ribosomal pequeña 40S que participa en el inicio de la traducción, la decodificación y la biogénesis global del ribosoma. Más allá de su función estructural en la síntesis de proteínas, RPS3 se ha relacionado con respuestas celulares al estrés y puede influir en redes de señalización conectadas con la regulación transcripcional, la apoptosis y las respuestas al daño del ADN. Dado que la función ribosomal condiciona la proliferación y la homeostasis del proteoma, la expresión alterada de RPS3 o el desequilibrio ribosomal se examinan con frecuencia en contextos de crecimiento oncogénico, señalización inflamatoria y estrés neurodegenerativo. Por ello, la perturbación de RPS3 es útil para desentrañar cómo el control de la traducción se interconecta con las vías de mantenimiento del genoma y de proteostasis.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Ribosomal Protein S3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RPS3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RPS3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RPS3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Ribosomal Protein S3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RPS3 para la investigación de la señalización de Ribosomal Protein S3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de RPS3 críticos para la función de Ribosomal Protein S3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RPS3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Ribosomal Protein S3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Ribosomal Protein S3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RPS3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Ribosomal Protein S3 (h) y el plásmido HDR Ribosomal Protein S3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RPS3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RPS3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.