Plásmido Doble Nickase (h) Ribosomal Protein L39: sc-410990-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Ribosomal Protein L39 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Ribosomal Protein L39 (h) y el plásmido de doble nickasa Ribosomal Protein L39 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a RPL39. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Ribosomal Protein L39 | sc-410990-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Ribosomal Protein L39 | sc-410990-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El RPL39 humano codifica la proteína ribosomal L39, un pequeño componente básico de la subunidad ribosomal grande 60S que contribuye al ensamblaje del ribosoma y a la traducción estable de los ARNm. Como parte de la maquinaria central de traducción, RPL39 influye en la capacidad de síntesis proteica, el control de calidad cotraduccional y programas celulares más amplios vinculados al crecimiento, las respuestas al estrés y la proteostasis. La alteración de proteínas ribosomales puede desencadenar estrés nucleolar y cambios posteriores en la señalización, incluidos puntos de control dependientes de p53, y puede modificar la selectividad translacional para transcritos específicos. La desregulación de la biogénesis y la función ribosomal se ha implicado ampliamente en ribosomopatías y en la reprogramación translacional asociada al cáncer, lo que convierte a RPL39 en un objetivo relevante para estudiar cómo una composición ribosomal alterada impacta el estado celular y fenotipos asociados a enfermedad.
Ribosomal Protein L39 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus RPL39 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de RPL39. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de RPL39. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con RPL39 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.