Ribosomal Protein L30 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406356

Descripción general

RPL30 codifica la proteína ribosomal L30, un componente esencial de la subunidad ribosomal grande 60S que contribuye al ensamblaje del ribosoma y a la elongación de la traducción. Como parte de la red de biogénesis ribosomal y síntesis proteica, RPL30 respalda la proteostasis y la señalización asociada al crecimiento al permitir una traducción eficiente del ARNm. La alteración de proteínas ribosomales puede activar respuestas de estrés nucleolar y modificar puntos de control dependientes de p53, vinculando la función ribosomal con el control del ciclo celular y la apoptosis. La biogénesis ribosomal desregulada y el control traduccional aberrante son características recurrentes en estados proliferativos y de adaptación al estrés, lo que hace que RPL30 sea relevante para estudiar mecanismos que acoplan la capacidad de traducción con la aptitud celular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Ribosomal Protein L30 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RPL30 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RPL30 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RPL30 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Ribosomal Protein L30.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RPL30 para la investigación de la señalización de Ribosomal Protein L30, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de RPL30 críticos para la función de Ribosomal Protein L30
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RPL30 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Ribosomal Protein L30 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Ribosomal Protein L30 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RPL30. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Ribosomal Protein L30 (h) y el plásmido HDR Ribosomal Protein L30 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RPL30 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RPL30 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.