Plasmide Double Nickase (h) Ribosomal Protein L10a: sc-417441-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Ribosomal Protein L10a correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Ribosomal Protein L10a Double Nickase (h) et le plasmide Ribosomal Protein L10a Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant RPL10A. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Ribosomal Protein L10a | sc-417441-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Ribosomal Protein L10a | sc-417441-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RPL10A code la protéine ribosomique L10a, un composant essentiel de la grande sous-unité ribosomique 60S, qui contribue à la biogenèse des ribosomes et à l’élongation peptidique lors de la traduction cytosolique. En participant à l’assemblage et au fonctionnement de la machinerie de traduction, RPL10A influence la protéostasie et les programmes de croissance cellulaire, lesquels interfèrent avec les voies de signalisation de réponse au stress et le contrôle du cycle cellulaire. Une modification du dosage ou de la fonction des protéines ribosomiques peut perturber la traduction globale et la traduction sélective de certains transcrits, reliant ainsi la biologie du ribosome aux mécanismes à l’origine de phénotypes développementaux et de la reprogrammation translationnelle associée aux tumeurs. RPL10A est donc fréquemment étudié dans le contexte des ribosomopathies, de la spécification des lignages et de la régulation de l’expression génique dépendante de la traduction.
Ribosomal Protein L10a Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus RPL10A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de RPL10A. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de RPL10A. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de RPL10A.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.