Plasmide Double Nickase (h) RHBDL6: sc-404212-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) RHBDL6 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide RHBDL6 Double Nickase (h) et le plasmide RHBDL6 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant RHBDF2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) RHBDL6 | sc-404212-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) RHBDL6 | sc-404212-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RHBDF2 code un membre inactif de la famille des rhomboïdes (iRhom2) qui régule le trafic et la maturation d’ADAM17/TACE, contrôlant ainsi le clivage ectodomainal (« shedding ») de nombreuses protéines membranaires, notamment le TNF et des ligands de l’EGFR. Par ce rôle, RHBDF2 influence la signalisation inflammatoire, l’activation de la voie EGFR et la protéostasie induite par le stress dans des contextes épithéliaux et immunitaires. Une activité altérée de RHBDF2 a été associée à une dérégulation de la signalisation des cytokines et des facteurs de croissance, et à des phénotypes hyperprolifératifs et inflammatoires, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques en biologie cutanée, immunité innée et décisions de destinée cellulaire dépendantes des signaux. RHBDL6 est couramment utilisé comme alias dans la dénomination de certains réactifs, mais le locus ciblé ici est le gène humain RHBDF2 dans une optique de génomique fonctionnelle centrée sur les voies.
RHBDL6 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus RHBDF2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de RHBDF2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de RHBDF2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de RHBDF2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.